用于基因治疗和DNA疫苗的质粒DNA大规模生产的阴离子交换方法的优化

这一点,我们广播地址特点:Jenny England, Thermo Fisher公司创新与应用部门的科研人员

随着基因治疗和质粒DNA (pDNA)疫苗的发展,需要大规模的纯化工艺来生产高纯度的质粒DNA。质粒DNA是生产腺相关病毒(AAV)或慢病毒(LV)等病毒载体的基础,是体外转录反应中mRNA生产的模板,可直接用作pDNA疫苗。典型的pDNA下游过程包括阴离子交换(AEX)和疏水相互作用色谱(HIC)步骤。然而,尽管对pDNA的需求在增加,但由于结合能力低、RNA去除和pDNA异构体分离,使用当前的下游工艺生产大量高纯度pDNA仍然是一个挑战。

在本次网络研讨会中,我们将讨论使用Thermo Scientific纯化5.3 kbp pDNA的捕获步骤的优化TM波罗斯岛TMAEX树脂成分股。采用实验设计(DoE)方法,通过小型高通量筛选柱,确定了三种不同表面化学性质的阴离子交换色谱树脂的最佳工艺条件。在1-mL色谱柱上,弱离子交换树脂(15 g/L)的动态结合能力最大,并通过缩小模型确定了这些优化条件。POROS的优势TM本文将讨论树脂在pDNA结合能力和杂质去除方面的作用,以说明这些层析介质的能力,以促进大规模质粒纯化过程的发展,以满足基因治疗和疫苗治疗日益增长的需求。

医药级试剂。仅供生产和实验室使用。

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