病毒清除

病毒载体的病毒安全性:
当病毒是产品时,会引起特别关注

任何关注宿主细胞蛋白质作为过程污染物的人都会告诉你,试图从大量相似分子的混合物中纯化特定类型的分子就像试图在一大堆不同的针头中找到一些特定的针头。从细胞培养液中纯化病毒载体也是如此。当病毒是产品时,不需要的病毒是必须分离的污染物,或者更好的是,防止被…

单克隆抗体病毒清除研究:
IND阶段的实质性平台方法

病毒去除/灭活是单克隆抗体(MAB)和其他重组蛋白药物安全性的主要问题。一些方法(如纳滤和低pH灭活)已被业界反复证明对大多数病毒是可靠的,去除率>4 log10。基于我的公司在其MAb下游工艺平台上的病毒清除经验,我们提出了一种“包围法”——仅测试处于设计空间极限的样本——以主动证明运行中的微小差异…

预测下游工艺开发中的病毒清除率

由于生物制药生产过程中可能出现病毒,监管机构要求在批准前对每种生物制药进行病毒清除验证研究。这些研究通常在生物安全等级(BSL)-2设施中进行,需要大量的资本和人力资源。使用准确、经济且可量化的非感染性病毒替代物将使下游纯化科学家能够在整个工艺开发过程中研究病毒清除。本报告探讨了使用BSL-1兼容的非感染性MVM颗粒预测病毒清除率的结果…

病毒检测变异是病毒清除研究中变异的主要来源:大数据集的回顾性分析

哺乳动物细胞培养生产的生物制药易受病毒污染。这一风险通过采用补充方法得以缓解。这些包括对细胞库的广泛测试、选择低风险原材料、测试病毒培养以及记录净化过程灭活和去除病毒污染物的能力。后者通常称为病毒清除率,通常表示为对数减少值(LRV)。诺和诺德针对不同的工艺和步骤进行了几项病毒清除研究。…

下游AAV过程中的病毒清除:使用模型病毒组和非感染替代物的案例研究

在过去的十年中,腺相关病毒(AAV)载体已经成为主要的基因传递载体。2017年,基因治疗的管道包括351种临床试验药物和316种临床前开发药物(1-4)。随着这些候选者的进步,正在为病毒载体的工艺开发和制造做出重大努力,总体目标是减少工艺杂质,同时保持尽可能高的工艺产量。为了实现这一目标,行业供应商开发了创新的AAV专用分离技术。赛默费希尔…

使用辣根过氧化物酶底物的生物层干涉法定制酵母HCP定量

生物制药是正在开发的药物中最大的一组(1),而且对新的和安全的药物产品的需求很高。用于生产的最常见的细菌和哺乳动物细胞系是大肠杆菌、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞和酵母。在生物生产过程中,细胞系不仅表达感兴趣的分子,还表达宿主细胞蛋白(HCPs)。它们被认为是最终药品中的杂质,因为它们会影响药效和安全性。

咨询专家:预测下游开发过程中的病毒清除

直到最近,下游过程开发(PD)团队还缺乏简单、有效和经济的方法来评估过程的病毒清除能力。2020年10月13日,Cygnus技术公司研发高级总监David Cetlin在“询问专家”的演讲中描述了包含非传染性模拟病毒颗粒(mvp)的MockV套件如何能够填补这一空白。病毒清除研究倾向于外包给合同研究组织(CROs),因为他们需要生物安全级别(BSL)-2和-3设施来与…

一滴雾水能造成多大的危害?对病毒失活步骤的考虑

病毒清除是生物制药产品病毒安全的一个基本方面。世界各地的监管机构要求生物制造商将其业务适当隔离,以降低先前工艺步骤或产品批次的遗留污染风险以及同一工厂生产的产品之间的交叉污染风险。指南在定义“适当”方面含糊不清,让生物制造商解释监管期望并定义自己的病毒减少和分离策略。考虑到制造工艺和设备之间的差异,例如…

使用新型混合仿生一次性阴离子交换器优化抛光和病毒清除

作为经验证的病毒清除策略的一部分,流经阴离子交换(AEX)色谱法经常用于生物制药纯化过程中,以减少净负电荷宿主细胞蛋白(HCP)和病毒(1,2)。AEX柱色谱法是最常用于静电病毒清除的技术,尤其是在商业规模的生物制药制造中,对于这种技术,柱具有可靠且众所周知的性能(3)的悠久历史。尽管如此,生物制药过程中AEX柱对HCP和病毒清除率的验证涉及到许多复杂因素,这些因素在很大程度上有助于…

病毒清除率测定的挑战:50%组织培养感染剂量(TCID)的估算50)对于低病毒浓度

进行病毒清除研究是制造哺乳动物细胞表达的所有生物药物的重要安全因素(1)。通常,病毒清除率被描述为对数减少值(LRV),并计算为输入与输出病毒载量之比的log10。病毒载量根据输入和输出部分的体积和浓度计算。病毒浓度通常使用Spearman–Kärber(SK)方程(2,3)计算为组织培养感染剂量(TCID50)的50%。在这个…